Ovizio 顯微鏡升級全息和熒光顯微成像系統(tǒng)
近幾年三維全息顯微鏡的發(fā)展為生物成像研究開辟了新紀元。三維計算全息技術(shù)所包含的數(shù)據(jù)處理使研究者獲得豐富的量化信息，
這些信息包含著非介入實時條件下的細胞或微生物結(jié)構(gòu)。
Ovizio成像系統(tǒng)平臺的技術(shù)基礎(chǔ)是**的微分數(shù)字全息顯微鏡。這種獨特的技術(shù)可對細胞進行實時無標(biāo)記監(jiān)測，也可以對多層細胞培養(yǎng)提供實時的監(jiān)控。
與傳統(tǒng)的光學(xué)顯微鏡只記錄光學(xué)強度相比，數(shù)字全息顯微（ DHM ）還可以存儲與光的相位以及樣品的光學(xué)厚度相關(guān)的數(shù)據(jù)，
應(yīng)用這些數(shù)據(jù)即可以進行定量成像應(yīng)用和自動化分析。全息技術(shù)的基本原理是物體反射的光波與參考光波相干疊加產(chǎn)生干涉條紋，
被記錄的這些干涉條紋稱為全息圖。全息圖在一定的條件下再現(xiàn) ，便可重現(xiàn)原物體逼真的三維像。
微分數(shù)字全息技術(shù)利用局部相干光（低功率，非侵入性的LED光源）可以帶來更高的圖像穩(wěn)定性，
也大大縮小了儀器的的尺寸，使得儀器可以應(yīng)用的場景更多。數(shù)字全息技術(shù)可以實現(xiàn)多重成像，
比如可以構(gòu)造強度圖像，定量相位圖像和覆蓋物體的形狀和密度的3D圖像。
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圖1 Ovizio 三維全息成像系統(tǒng)QMOD模塊
Ovizio QMOD模塊可將對細胞分析的準(zhǔn)確性和易用性提高到一個新的水平。
其可以作為一個模塊與顯微鏡的C型接口直接相連（C型接口一般與像機相連，一般為專用接口），
該QMOD系統(tǒng)可以對培養(yǎng)皿、燒瓶和多孔板等多層透明容器直接分析，提供特別方便和快速的解決方案。
通過OsOne軟件，研究人員可以自動掃描多孔板，并跟蹤監(jiān)測細胞的變化，分辨活細胞和死細胞之間的區(qū)別，
為了提供*佳的分辨率，與OsOne軟件獲取的圖像還可以進行重新調(diào)整聚焦。
此外，Ovizio QMOD模塊還可以與熒光顯微鏡（ Ovizio**）的組合，
QMOD模塊可以得到與全息圖重疊的熒光信號，這種獨特的研究方法能夠在生物、環(huán)境、生理、病理研究中得到應(yīng)用。
該方法無需對樣品制備，也不需要特殊的試劑或者對細胞進行固定，所以其是一種對環(huán)境特別友好的實驗方法。
該QMOD模塊已經(jīng)在*常用的顯微鏡，如蔡司Axioplan，尼康Labophot2，
尼康的EclipseTS100-F，徠卡DMIRB或奧林巴斯AX70、奧林巴斯AX71試驗成功。
該平臺上監(jiān)控實時多層細胞，并測量細胞計數(shù)和每層細胞的活性分析。
該平臺使用Ovizio的OsOne軟件進行完全自動化的運算，非常易于操作。
作為一種非常新穎的以量化和數(shù)據(jù)為基礎(chǔ)的成像技術(shù)，其可以幫助科學(xué)家大大簡化研究工作。
QMOD模塊進行全息技術(shù)和熒光成像，同時分析藻類細胞的脂質(zhì)積累
QMOD獲得的硅藻息圖
QMOD獲得的（A ）的全息圖，這種全息圖同時包含光強度信息（B）和相位信息（C）的代表對象的光學(xué)厚度。
物體的光學(xué)厚度更清楚地顯現(xiàn)在相位圖像（D）中，可進行硅藻的偽3D可視化，厚度為0.7微米。
QMOD主要應(yīng)用范圍
QMOD可實現(xiàn)對微觀物體三維形貌的高分辨率觀察和動態(tài)測量。
進行對細胞進行三維曝光而不損傷細胞，提供**的延時成像記錄，可用于神經(jīng)細胞、干細胞、癌細胞等的研究；
可從細胞面積、光學(xué)厚度、體積等多方面了解細胞分化，并通過延時成像記錄還原分化全過程；
可以測定細胞折射率，因此不需要染色，可直接觀察活細胞與死細胞，并區(qū)分凋亡細胞與死細胞；
對細胞運動與遷移，可以給予準(zhǔn)確的跟蹤記錄，并再現(xiàn)還原其過程，得到細胞運動平均速率、融合度對速率的影響、細胞大小、厚度和體積與速率的相關(guān)性等；
siRNA對細胞的作用，首先表現(xiàn)在細胞增殖或形態(tài)的改變。根據(jù)細胞數(shù)量及形態(tài)參數(shù)的變化，可以有效地驗證siRNA的功效；在藥理或毒理實驗中，
藥效、基因或蛋白對細胞增殖的調(diào)控大多首先通過形態(tài)學(xué)參數(shù)反應(yīng)出來。
QMOD可以用于監(jiān)測以下參數(shù)
細胞計數(shù)
細胞活性
細胞融匯程度
細胞形態(tài)學(xué)
細胞毒性測定
熒光和全息分析
流式細胞微速攝影
體外細胞系分析
多孔板的篩選
生物膜監(jiān)控
還有更多的應(yīng)用程序.
系統(tǒng)亮點概括如下：
1.三維全息顯微鏡成生物成像領(lǐng)域“新寵”，可繪制3D細胞圖，能提供細胞的厚度信息
2.DHM不需要對樣品掃描就可以擁有激光掃描共聚焦顯微鏡進行三維成像的優(yōu)點，成像速度快，便于細胞實時檢測和時間動態(tài)過程研究
3.實時、非侵入生物樣品的三維可視化成像,背景對比度高,不需要對細胞進行染色和固定，大大提高細胞的存活率
4.非介入三維實時成像和鑒別細胞、微生物的實用技術(shù)，對細胞無傷害。
5.DHM定量相位成像方法，直接和非介入地提供活體細胞的光學(xué)厚度和動態(tài)條件
6.可以進行更復(fù)雜的分析和細胞操作控制等
相關(guān)參數(shù)
工作距離: 取決于物鏡, 0.5-20mm
自身放大倍數(shù)：10×
圖像捕獲速度: 15幀/秒
圖像抓拍時間：1-3秒
數(shù)值孔徑（1/NA）：3
垂直分辨率：2nm
橫向分辨率: 2nm
垂直聚焦距離：3-5微米
視場大?。?50微米×750微米
工作溫度：0-40℃
工作電壓：110-220V AC
關(guān)于C型接口
C型接口在國際上有嚴格的規(guī)格要求，根據(jù)“ANSI B1.1”國際標(biāo)準(zhǔn)設(shè)計，C型接口的每個螺紋的直徑是1英寸（25毫米），
也就是每英寸32圈螺紋，而C型接口的安裝基準(zhǔn)面到焦平面距離也嚴格規(guī)定為17.526mm。除此以外，
還有另一種工業(yè)標(biāo)準(zhǔn)的CS型接口，安裝基準(zhǔn)面到焦平面距離為12.5mm。
蔡司、萊卡、尼康的顯微鏡C型接口.
顯微鏡接口特點：
1.適用性廣，適用任何品牌的顯微鏡；
2.心對焦技術(shù)，使用中心對焦工藝和光學(xué)技術(shù),使更快,更容易地對焦 ；
3.圖像質(zhì)量高，使系統(tǒng)攝像更加固定,不會產(chǎn)生振動而影響圖像質(zhì)量 ；
4.外型設(shè)計小巧，外型小巧、美觀。
蔡司、萊卡、尼康（奧林帕斯）的顯微鏡C型接口
奧林帕斯顯微鏡普遍使用的C型接口，用于接QMOD模塊
系統(tǒng)組成部分：
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預(yù)裝Qmod成像控制分析軟件的電腦系統(tǒng)
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QMOD模塊與顯微鏡的連接C型適配器
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QMOD全息模塊控制儀
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附件包
QMod
Holographic And Fluorescence Microscopy. In One Single System.
The new Ovizio QMod microscopy module takes the accuracy & simplicity of cell analysis to the next level. Available as a kit, it can be fixed on the c-mount where the camera is usually attached to the microscope. The QMod system is a particularly convenient and fast solution for direct cell counting in transparent supports, from petri dishes, flasks and multi-well plates to multi-layer vessels.
Designed for high precision, the QMod module generates in real-time the holographic fingerprint of each cell enabling the user to select and observe cells individually, based on a pre-defined set of parameters. Operated with the OsOne software, scientists can now automatically scan multi-well vessels, trace changes, make the distinction between living and dead cells and can even eliminate debris. To offer the best resolution, the images acquired with the OsOne software can ultimately be refocused post-acquisition.
Furthermore, in combination with a fluorescence microscope, the QMod module makes it now possible to overlay your fluorescent signal with your hologram! This unique approach opens the door to even more applications, with for example: confirmation of the results achieved in a label free set-up without the need for sample preparation, reagents and cell fixation. Applying the same device and sample, this method avoids the creation of toxic waste.
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Counting
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Viability
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Confluence
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Morphology
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Toxicity Assays
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Fluorescence & Holography
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Time-lapse Cytometry.
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In Vitro Cell Line Assays
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Multi-well Plate Screening
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Biofilm Monitoring
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Many more applications to come…
The qMod module has been successfully tested on the most used microscopes as the Zeiss Axioplan, Nikon Labophot 2, Nikon Eclipse TS100-F, Leica DM IRB or Olympus AX70.